【纳米颗粒跟踪分析（NTA）测试测定实验外包技术服务】

目前主要的外泌体分离方法是依据外泌体直径、结构等特点进行富集，或对特定膜蛋白进行捕获，产物中不可避免包含一些其他类型的囊泡，需要对外泌体进行鉴定，以保证所研究的材料外泌体的浓度和纯度。2014年国际细胞外囊泡学会（ISEV）提出，外泌体鉴定分为三个层面：电镜鉴定形态学特征、NTA鉴定粒径和浓度、蛋白标志物。 Zetaview（Particle Metrix）可快速、稳定地进行外泌体粒径、浓度和纯度鉴定。其方法原理即纳米颗粒跟踪分析（Nanoparticle Tracking Analysis，NTA），单一颗粒跟踪技术并结合经典微电泳技术（zeta电位）和布朗运动，利用Stockes-Einstein方程式计算出纳米颗粒的流体力学直径和浓度。NTA是国际细胞外囊泡学会（ISEV）和广大研究者认可的外泌体鉴定技术之一，NTA技术能够实现简单、快速，不破坏外泌体原始状态。并且再搭配相应滤光片，可以测量荧光抗体（如CD9, CD63, CD81等）标记的外泌体来测定外泌体纯度。而且具有检测速度快的特点，每个样本只需5-10分钟。 使用纳米颗粒跟踪分析（NTA）技术测定 外泌体浓度、粒径大小及表型 NTA 在检测时通过光学显微镜收集外泌体的散射光信号，观测一段时间内颗粒在溶液中做布朗运动的影像，并对每一个颗粒进行追踪和分析，再通过爱因斯坦方程式（图二）计算出外泌体的流体力学尺寸和浓度。 我们在检测过程中是直接追踪拍摄影像中的每一个颗粒，所以 NTA 对于复杂的样品的检测具有极高的分辨率，可以将不同大小的颗粒清楚的区分开来，这对外泌体的检测来说非常重要。NTA 测量浓度时，测量的结果取决于仪器参数的设定，恰当的参数设定可以保证不同大小颗粒都被我们的软件追踪到并参与计算。 外泌体参与了各种疾病的发生发展过程，与介导血管再生、肿瘤细胞增殖、免疫逃逸等都脱不开关系，在医疗诊断方面具有巨大前景。相应的对外泌体的检测，变得尤为重要。NTA 技术对外泌体的检测具有实时观测、高分辨率、荧光分析等功能，检测数据快捷可靠， 纳米颗粒跟踪分析（NTA）技术利用光散射和布朗运动的特性获得液体悬浮液中的样本粒度分布。